方法二、鹽解-樹脂法提取 取新鮮豬腸黏膜投入反應(yīng)鍋中,按30g/L(3%)加入氯化鈉,NaOH調(diào)節(jié)pH9,逐步升溫至50-55℃,保溫2h,繼續(xù)升溫至95℃,維持10min,冷卻50℃以下,用30目雙層紗布過濾,收集濾液。豬腸黏膜[NaCl; NaOH]→[pH9; 50-55℃]濾液吸附、洗滌、洗脫、沉淀 取冷卻50℃以下的濾液,加入714型(強(qiáng)堿性)Cl-型樹脂(新樹脂用量為2%),攪拌8h后靜置過夜。次日虹吸除去上層液,收集樹脂,用水沖洗至洗液澄清,濾干,用2倍量1.4mol/L氯化鈉攪拌2h,濾干;再用1倍量1.4mol/L氯化鈉攪拌2h,濾干;繼續(xù)改用2倍樹脂量的3mol/L氯化鈉攪拌洗脫8h,濾干;再用1倍量3mol/L氯化鈉攪拌洗脫2h,濾干,合并濾液,加入等量95%乙醇沉淀,過夜,虹吸除去上清液,收集沉淀。丙酮脫水干燥,得粗品。濾液[714型樹脂]→吸附物[NaCl]→[1.4mol/L, 3mol/L]洗脫液[95%乙醇,丙酮]→粗品溶解、脫色、沉淀、干燥 粗品溶于15倍10 g/L(1%)氯化鈉溶液中,加入6mol/L鹽酸調(diào)pH1.5左右,過濾至清,隨即用5mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH11,按3%加入過氧化氫(濃度為30%)25℃放置。開始不斷調(diào)整pH至11,第2天再按1%加入過氧化氫,調(diào)整pH11,繼續(xù)放置,共48h。過濾,用6mol/L鹽酸調(diào)節(jié)pH6.5,加入等量的95%乙醇沉淀。過夜。次日虹吸除去上清液,沉淀用丙酮洗滌脫水,干燥,即得肝素鈉精品。總收率20000U/kg腸黏膜(按腸黏膜的固體量為5%-7%計算)。粗品[1%NaCl, 6mol/L HCL]→[pH1.5]濾液[NaOH, H2O2]→[pH11, 25℃, 48h]濾液[6mol/L HCl, 95%乙醇]→[pH6.5, 24h]沉淀[丙酮]→肝素鈉精品

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